New Tech kompaniyasining to'liq avtomatik nuklein kislotasini olish va aniqlash mashinasi

Beshta kuch:
● Nuklein kislota ekstraktsiyasi va tozalangan qadam bilan sozlangan asbob
● Ultrasonik ekstraksiya moduli bilan tuzilgan asbob
● To'liq avtomatik tarzda sozlangan asbob
● O'zgaruvchan haroratni kuchaytirish bilan sozlangan asbob
● To'liq yopiq reagentlar to'plami bilan sozlangan asbob

1. Nuklein kislotani aniqlash reagentlarini ajratib olish va tozalash kerakmi?
Nuklein kislotani aniqlash printsipi quyidagicha: primer ta'sirida DNK polimeraza DNK/RNK shablonida zanjir reaktsiyasini kuchaytirish uchun ishlatiladi (NA ning teskari transkripsiyasini talab qiladi), so'ngra chiqarilgan floresan signal miqdori aniqlanadi. namunada aniqlanishi kerak bo'lgan patogenning nuklein kislotasi (DNK/RNK) mavjudmi.

1) Ekstraksiya qilinmagan yoki tozalanmagan namunalar yakuniy natijaga ta'sir qiluvchi ko'plab komponentlarni o'z ichiga olishi mumkin: nukleaza (maqsadli nuklein kislotani eritib, noto'g'ri manfiyga olib kelishi mumkin), proteaza (DNK polimerazasini kamaytirishi va noto'g'ri manfiyga olib kelishi mumkin), og'ir metal tuz (bu sintaza inaktivatsiyasiga olib keladi va noto'g'ri musbat ), juda kislotali yoki juda ishqoriy PH (reaksiya muvaffaqiyatsizlikka olib kelishi mumkin), to'liq bo'lmagan RNK (noto'g'ri salbiy teskari transkripsiya etishmovchiligiga olib keladi).

2) Ba'zi namunalarni to'g'ridan-to'g'ri ko'paytirish qiyin: gramm-musbat va ba'zi parazitlar, qalin hujayra devorlari va boshqa tuzilmalari tufayli, agar ular nuklein kislotasi ekstraktsiyasi va tozalash jarayonidan o'tmasa, ekstraktsiyasiz to'plam bunday namunalar uchun ishlamay qolishi mumkin. namunalar.

Shuning uchun nuklein kislotani olish bosqichiga moslashtirilgan sinov to'plamini yoki asbobni tanlash tavsiya etiladi.

2. Kimyoviy ekstraktsiya yoki fizik ultratovushli parchalanish ekstraktsiyasi?
Umuman olganda, kimyoviy ekstraktsiyani ko'pchilik oldindan tozalash va tozalash uchun qo'llash mumkin.Ammo qalin devorli Gram-musbat bakteriyalarda va ba'zi parazitlarda kimyoviy ekstraktsiya samarali nuklein kislota shablonlarini ololmaydi, bu noto'g'ri manfiy aniqlashga olib keladi.Bundan tashqari, kimyoviy ekstraksiya ko'pincha kuchli vositalardan foydalanadi, agar elutsiya to'liq bo'lmasa, reaktsiya tizimiga kuchli gidroksidi kiritish oson, natijada noto'g'ri natijalarga erishiladi.

Ultrasonik parchalanish jismoniy maydalashdan foydalanadi, u POCT sohasidagi etakchi korxona GeneXpert tomonidan inson foydalanishi uchun muvaffaqiyatli qo'llanilgan va ba'zi murakkab namunalarning (masalan, Mycobacterium tuberculosis) nuklein kislotasini olishda mutlaq ustunlikka ega.

Shuning uchun nuklein kislotasi ekstraktsiya bosqichi bilan tuzilgan sinov to'plami yoki asbobni tanlash tavsiya etiladi.va ultratovushli ekstraksiya moduli mavjud bo'lsa optimal hisoblanadi.

3. Manual , Yarim avtomatik va to'liq avtomatikmi?
Bu ish haqi va ish samaradorligi muammosi.Hozirgi vaqtda uy hayvonlari kasalxonasida xodimlar etarli bo'lmagan, nuklein kislotalarni olish va aniqlash ma'lum mahorat va tajribani talab qiladigan ishdir.Hech shubha yo'qki, to'liq avtomatik nuklein kislotani olish va aniqlash mashinasi mukammal tanlovdir.

4. Doimiy haroratni kuchaytirish yoki o'zgaruvchan haroratni kuchaytirish?
Kuchaytirish reaktsiyasi nuklein kislotani aniqlash havolasidir va bu havolada ishtirok etadigan professional texnologiya murakkab.Qo'pol qilib aytganda, fermentlar nuklein kislotani kuchaytirish uchun ishlatiladi.Kuchaytirish jarayonida kuchaytirilgan floresan signali yoki o'rnatilgan floresans signali aniqlanadi.Umuman olganda, flüoresans signali qanchalik erta paydo bo'lsa, namunadagi maqsadli gen tarkibi shunchalik ko'p bo'ladi.

Doimiy haroratning kuchayishi - bu belgilangan haroratda nuklein kislotaning kuchaytirilishi, o'zgaruvchan haroratning kuchayishi esa denaturatsiya-tavlanish-kengaytmasiga muvofiq tsiklik kuchaytirilishidir.Doimiy haroratni kuchaytirish vaqti amalga oshirildi, o'zgaruvchan haroratni kuchaytirish vaqti esa asbobning harorat ko'tarilishi va tushishi tezligidan katta ta'sir ko'rsatadi (hozirda ko'plab ishlab chiqaruvchilar taxminan 30 daqiqada 40 ta kuchaytiruvchi tsiklni bajarishga muvaffaq bo'lishdi).

Agar laboratoriya sharoitlari yaxshi bo'lsa va rayonlashtirish qat'iy bo'lsa, ikkalasi o'rtasidagi aniqlik farqi katta bo'lmaydi, deb aytish o'rinli.Biroq, o'zgaruvchan haroratni kuchaytirish nisbatan qisqa vaqt ichida ko'proq nuklein kislota mahsulotlarini sintez qiladi.Qattiq rayonlashtirish va professional tayyorgarlikka ega bo'lmagan laboratoriyalar uchun nuklein kislotasi aerozolining oqish xavfi kattaroq bo'ladi, noto'g'ri musbat oqish sodir bo'lganda paydo bo'ladi va uni bartaraf etish juda qiyin.

Bunga qo'shimcha ravishda, doimiy haroratni kuchaytirish, shuningdek, namuna murakkab bo'lsa, o'ziga xos bo'lmagan kuchaytirilishga ko'proq moyil bo'ladi (nisbiy reaktsiya harorati pastroq va kengayish harorati qanchalik yuqori bo'lsa, primerni bog'lashning o'ziga xosligi shunchalik yaxshi bo'ladi).

Hozirgi texnologiyaga kelsak, o'zgaruvchan haroratni kuchaytirish yanada ishonchli.

5. Nuklein kislotani kuchaytiruvchi mahsulotlarning sizib chiqishi xavfini qanday oldini olish mumkin?
Hozirgi vaqtda ko'plab ishlab chiqaruvchilar ishqalanish bilan muhrlangan nuklein kislota reaktsiyasi trubkasi sifatida bez tipidagi PCR trubkasini tanlaydilar va o'zgaruvchan haroratda o'zgaruvchan harorat denaturatsiyasida harorat denaturatsiyasi PCR amplifikatsiyasi 90 darajaga etadi.
Santigrad.Issiqlik bilan kengayish va sovuq bilan qisqarishning takroriy jarayoni PCR trubasini muhrlash uchun katta qiyinchilik tug'diradi va bez tipidagi PCR trubkasi oqishni keltirib chiqarishi nisbatan oson.

Reaksiya mahsuloti oqib chiqmasligi uchun reaksiyani to‘liq yopilgan to‘plam/nay bilan qabul qilish ma’qul.Nuklein kislotani olish va aniqlash uchun to'liq muhrlangan to'plam ishlab chiqilsa, juda yaxshi bo'lar edi.

Shunday qilib, New Tech-ning yangi to'liq avtomatik nuklein kislotasini olish va aniqlash mashinasi yuqoridagi beshta optimal variantga ega.